6.1. Морфологические основы бактерицидного эффекта  анолита.

     Для трансмиссионной электронной микроскопии микроорганизмы фикси- ровали в 2,5% растворе глутарового альдегида на 0,1 М фосфатном буфере при рН 7,4.  Обезвоженную в спиртах и ацетоне восходящей  концентрации взвесь заливали в смесь эпон-аралдита. Полутонкие (ПТС) и ультратонкие (УТС) срезы получали  на  ультрамикротоме  "Ultracut"  (Reichart-Jung, Австрия).  УТС контрастировали в приборе "Ultrastein 2168" (LKB,  Шве- ция) уранилацетатом и цитратом свинца и исследовали в  трансмиссионном электронном микроскопе "Н-600" (Hitachi,  Япония). ПТС окрашивали 0,5% раствором метиленового синего и 0,5% раствором фуксина.      Для сканирующей  электронной  микроскопии  материал фиксировали в 2,5% растворе глутарового альдегида на О,1М фосфатном буфере рН - 7,4, промывали в фосфатно-солевом буфере,  дегидратировали в растворах аце- тона возрастающей концентрации и высушивали  способом  перехода  через критическую  точку  закиси  азота в аппарате HCP-2 (Hitachi).  Кусочки монтировали на алюминиевые подложки электропроводящим клеем. На их по- верхность способом ионного напыления в аппарате IB-3 (Eiko, Japan) на- носили тонкий слой золота.  Препараты исследовали в сканирующем элект- ронном микроскопе S-4O5 A (Hitachi) при ускоряющем напряжении 15 кВ.      Статистическую обработку данных проводили методами вариационной и альтернативной  статистики с применением компьютерных прикладных прог- рамм на IBM PC AT 386 SX.  Создана база данных  при  помощи  программы "Quattro  Pro  4.0"  с системой управления базой данных "Paradox 3.5". Корреляционный анализ данных проводили при помощи  "Statgraph  2.1"  и приложений "Windows 3.1".  Графический материал создавался посредством графических программ "Harvard 3.0",  "Boeing 2.3" и  "Pbrush"("Windows 3.1").      Изучено влияние ЭВР-А с редокс потенциалом от +400 мВ до +1200 мВ на 500 млн.  взвесь E.coli,  Staph. aureus и 50 млн. Candida albicans, экспозиция 15-30 мин.      Выявлено, что  ЭВР-А вызывает выраженные изменения формы и разме- ров микроорганизмов Е.coli и Staph.  aureus и грибов Candida albicans. Наблюдается достоверное увеличение количества дегенеративных форм мик- роорганизмов, что подтверждают и стереоморфометрические данные. Элект- ронная микроскопия показала,  что обработка ЭВР-А  в начале при- водит к уменьшению липидных и гликогеновых гранул в микробных клетках. с увеличением времени обработки и величины редокс потенциала появляют- ся микроэрозии на их поверхности,  затем происходит нарушение  целост- ности плазматических мемебран микроорганизмов,  вплоть по полного раз- рушения (Рис.6.2, 6.3).


Дом.

Главная

Отзывы