ГЛАВА 5.  АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА ЭЛЕКТРОАКТИВИРОВАННОГО СВОЙСТВА АНОЛИТА

     Одним из  первых  экспериментов  по изучению свойств анолита были эксперименты по выявлению нижнего предела параметров,  при котором на- чинают проявляться его бактерицидные свойства.  В качестве тесткультур в этом эксперименте были выбраны следующие культуры Микроорганизмов:      - E.  coli (кишечная палочка) - как наиболее  устойчивый  вид  из группы кишечных бактерий;      - Staphylococcus aureus (стафилококк золотистый) -  как  наиболее устойчивый вид из кокковой группы микробов;      - Bacterium antracoides (антракоид) - один из наиболее устойчивый представителей спорообразующих микроорганизмов.      Бактерицидные свойства анолита определялись по методикам,  наибо- лее широко используемым в практике для изучения химико-терапевтических и дезинфицирующих средств.      Для определения  микробных  взвесей  использовали смыв с суточных культур стафилококка и кишечной палочки.  Спорообразующая культура ис- пользовалась  после суточной инкубации при 37ОС и дальнейшего выдержи- вания ее в течение 7-8 суток при комнатной температуре. Спорообразова- ние контролировали микроскопией окрашенных мазков.      Необходимые концентрации  микробных взвесей получали общепринятым путем с помощью эталонного бактериального стандарта мутности.      При постановке опытов,принятых для изучения химикотерапевтических веществ, в работе были использованы 3 концентрации микробных взвесей - 2,5 млрд. микробных тел (1), млн. микробных тел (2) и 500 тыс. микроб- ных тел (3),  из них наименьшая (3) соответствовала общепринятой стан- дартной концентрации. С целью максимального уменьшения разведения ано- лита, микробные взвеси вводили в исследуемый раствор в объеме 0,2 мл.      Исследовались порции ЭВР-А с величиной ОВП от  плюс  200 мВ  (ис- ходной) до плюс 1260 мВ через каждые 100  мВ.  При  этом  величина  рН ЭВР-А изменялась пропорционально ОВП. Концентрация  "активного"  хлора (С а.х) была не менее 50 мг/л при максимальных параметрах рН  (1,2 ед) и ОВП (+1260 мВ). ЭВР-А получали из 0,9% раствора NaCl путем обработки его в диафрагменном электролизере "Эсперо-1".      Все образцы растворов исследовались также на стерильность соглас- но инструкции ("Инструкция по бактериологическому контролю консервиро- ванной крови, ее компонентов, препаратов." М., 1974).      Для сравнения испытывали широко применяющейся в медицинской прак- тике антибактериальный препарат широкого спектра действия  -  0,5%-ный раствор диоксидина, а также дезинфицирующее и антисептетическое средс- тво - 0,1 и 0,5%  растворы хлоргексидина биклюконата.  Анолит  начинал проявлять бактерицидные свойства с параметром ОВП плюс 500 мВ и рН+4,8 ед,  при которых ингибировал рост стафилококка и  кишечной  палочки  в третьей (стандартной) концентрации.      Наиболее эффективным  можно  считать  анолит с величиной ОВП - от плюс 900 до 1260 мВ и рН - от 3,5 до 1,2 ед.  соответственно, С а.х 50 мг/л, при воздействии которого получены совпадающие тремя методами ре- зультаты по бактерицидному эффекту даже при II-й,  значительно высокой концентрации микробных взвесей стафилококка и кишечной палочки.      Воздействие 0,5% раствора диоксидина и 0,1% раствора хлоргексиди- на оказалось слабее - бактерицидное действие их  проявлялось  лишь  на минимальной  (Ш-й)  концентрации микробов и не при всех использованных методах. По силе биомикробного воздействия анолит с параметрами ОВП от + 900 до 1260 мВ и рН лт 3,5 до 1,2 ед. можно сравнить лишь с эффектом использования более концентрированного 0,5% раствора хлоргексидина.      Бактерицидное действие анолита в отношении Ш-й концентрации  про- являлось при активности раствора при параметрах ОВП плюс 900 мВ и выше и рН= 3,5 ед.  и ниже, а в отношении П-й концентрации при максимальных показателей  активности ОВП = + 1150 и 1260 мВ и рН от 1,5 ед.  до 1,2 ед.  Однако, эти результаты были получены лишь в методах без использо- вания  зараженных  тест-объектов - на них растворы оказали споростати- ческое воздействие, задерживая рост микроорганизмов на 2-4 суток.      Таким образом, исследованные растворы с параметрами ОВП +900 мВ и выше и рН=3,5 ед. и ниже, С а.х 50 мг/л приводят к гибели стафилококка и кишечной палочки при концентрации 400 млн.микробных тел (П) и споро- вой палочки при концентрации 400 тыс.  микробных тел (Ш). Наиболее вы- сокая  (1)  концентрация микробной взвесии везде давала рост.  Однако, при специальных исследованиях, с повторным воздействием растворов (при добавлении  свежего раствора к трижды отмытому в физиологическом раст- воре осадку) было установлено бактерицидное действие и на 1 концентра- цию микробной взвеси.      Все приведенные  выше данные были получены со штаммами микроорга- низмов, наиболее широко используемыми в практике исследования бактери- цидных и бактериостатических свойств тел или иных препаратов. Нами бы- ли проведены исследования влияния анолита с максимальными  параметрами ОВП плюс 1260 мВ и рН равным 1,2 ед. и других тест-штаммах (суспензиях суточных агаровых культур музейных штаммов) патогенных  и  сапрофитных бактерий:      1. E.coli сапрофитный штамм.      2. E.coli 055-патогенный.      3. Staphylococcus Pyogenis N 1;4.      4. Staphylococcus epidermidis N 82.      5. Bacterium subtilis      6. Shigelloe flexneri      7. Shigllae sonnei      8. Salmonellae paratyphi A      9. Salmonellae typhi murium      Суточные культуры смывались физиологическим раствором,  и суспен- зии их устанавливались по густоте стандарта мутности до 10 ед.  (стан- дарт мутности изготовлен гос.  контрольным институтом им. Тарасевича). Затем  из полученной суспензии готовились разведения в физиологическом растворе до содержания 1 млн.  микробных тел в 1 мл суспензии. В опыте использовались 1 мл суспензии,  содержащей 1 млн.  микробных тел. Воз- действие анолита на суспензии бактерий продолжалось в  термостате  при Т=37ОС  в  течение 1-5-15 мин для установления оптимального срока воз- действия анолита на культуры бактерий. Для этого к 1 мл анолита добав- ляли 1 мл суспензий бактерий, содержащей 1 млн. микробных.        Опыты показали,  что рост бактерий отсутствовал при инкубации в термостате в течение 1 и более мин ( табл. 5.1).      После инкубации в термостате,  культуры бактерий (1 мл жидкости + анолит) помещали в стерильные чашки Петри и смешивали с 15 мл расплав- ленного и остуженного до 45ОС питательного  агара  для  выращивания  в термостате  в течение суток.  На следующий день производили учет коло- ний,  выросших в чашках. Одновременно с опытом ставился контроль: сме- шивали  1 мл суспензии культуры с физиологическим раствором в объеме 1 мл, инкубировали 15 мин в термостате, а затем 1 мл суспензии помещался на чашку Петри, заливался питательным агаром и инкубировался в течение суток.  При этом было выявлено, что анолит оказывает бактерицидный эф- фект по отношению ко всем вышеуказанным штаммам бактерий,  в то время как в контроле был обнаружен рост бактерий.      Как всякая активированная система,  анолит подвержен процессу ре- лаксации, т.е. процессу возвращения в состояние устойчивого термодина- мического равновесия.  Процесс релаксации у анолита проявляется в пос- тепенной  потере им высоких бактерицидных свойств.  После процесса ре- лаксации анолит сохраняет невысокую бактерицидность. В период релакса- ции неустойчивые метастабильные соединения в анолите типа HClO перехо- дят в устойчивые HCl,(дополнить).. которые и обеспечивают остаточную бактерицидность анолита.  Для определения времени активной бактерицид- ности анолита были использованы следующие культуры:      - E.coli  сапрофит;      - Salmonellae epidermidis;      - Staphylococcus pyogenes;      - Bacterium sibtilic      Все культуры  были использованы в концентрациях 1 млн.  микробных тел.  Анолит получали из 0,9% раствора NaCl в аппарате "Эсперо-1". Па- раметры анолита были - рН=1,2 ед, ОВП - плюс 1260 мВ, С а.х - 50 мг/л.      Методика исследований была прежней.      В результате исследований было выявлено полное  отсутствие  роста указанных культур на чашках Петри, при инкубации в течение 2 часов; 24 часов; 7 суток, 14 суток при условии хранения анолита в герметично за- купоренной таре. Начиная с 14 суток отмечался постепенный рост колоний на чашках Петри.      Результаты исследований по установлению времени активного  бакте- рицидного действия анолита суммированы в табл. 5.2.


Дом.

Главная

Отзывы