3.4. Биохимические изменения в ранах под воздействием ЭВР.
В первые сутки после операции биохимические показатели в ранах опытной и контрольной групп особенно не изменялись. Через сутки после операции в группе, обработанной ЭАВР, содержа- ние глюкозы было ниже на 25%, чем в контроле. В коже, окружающей рану уменьшалась соответственно на 10%. На 3-е сутки произошло резкое уве- личение глюкозы в глюкозы в контролем и превысило концентрацию послед- ней на 20%. В коже произошло равномерное увеличение содержания глюкозы как в контрольной группе, так и в опытной. На 7-е сутки еще прослежи- вается различие между опытной и контрольной группами, которое практи- чески не определялось к 14-м суткам после операции (табл.3.9) Изменения касались также и метаболитов глюкозы. Содержание лакта- та в тканях ран,обрабатываемых ЭВР, в первые трое суток было значи- тельно ниже, чем в контрольной. Через сутки после нанесения дефекта-на 13%,а на 3-е -21%. В коже,окружающей раны,в эти же сроки содержание лактата было выше у опытной группы,соответсвенно на 45 и 35%. В даль- нейшем концентрация лактата в ранах опытной группы снижалась значи- тельно медленнее,чем в контрольной. В коже концентрация лактата про- должала увеличиваться в течение 2-х недель после операции (табл.3.3). Содержание пирувата в тканях ран умеренно возрастало к 7- м сут- кам в обеих группах. К концу второй недели после операции происходило его снижение (табл.3.9). Изучение ферментов углеводного обмена показало следующее: актив- ность гликолитического фермента лактатдегдрогеназы (ЛДГ) в тканях ран опытной группы в первые сутки возросла на 12% по сравнению с контроль- ной группой. На 3-и сутки отмечено снижение активности фермента в опытной группе на 26%. В дальнейшем активность ЛДГ вновь повысилась в ранах, обрабатываемых ЭВР, оставаясь на 14 суток выше контроля. В ко- же активность фермента резко снизилась в опытной групп на 3-е сутки на 25%, по отношению к контролю. В остальные же сроки наблюдений показа- тели активности ЛДГ в опытной и контрольной группах существенно не от- личались (табл.3.10). Активность ферментов пентозного цикла повысилась в первые сутки в тканях ран, обрабатываемых ЭВР, оставаясь таковой до конца сроков наблюдений. В коже,окружающей раны, в первые сутки отмечено увеличение актвности глюкозо-6-фосфата (Г-6-Ф) в контрольной группе. К третьим суткам происходит выравнивание фермента в опытной контрольной группах. На 14-е сутки обнаруживалось повышение активности Г-6-Ф в опытной группе, по сравнению с контрольной на 35% (табл.3.10). Активность другого фермента пентозного цикла-транскеталазы воз- росла в первые сутки после операции в опытной группе по сравнению с контрольной на 17%. В дальнейшем активность этого фермента в группе, обрабатываемой ЭВР, превышала контрольные показатели, но незначитель- но. В коже, окружающей раны, в первые сутки отмечено увеличение актив- ности транскеталазы в опытной группе. В последующие сроки показатели активности фермента в опытной группе были ниже, чем в контрольной (табл.3.10). Основные изменения в содержании биогенных аминов (гистамина и се- ротонина) в тканях ран и коже вокруг них происходили на 3 и 7-е сутки после операции. Так,концентрация гистамина в тканях ран опытной группы на 3-е сутки составляла 4.54+0.3мкг/г, в контрольной 1.11+0.16мкг/г (Р/0.001). Еще большее различие наблюдалось в коже, окружающей ткани ран - в опытной группе - 6.64+0.4мкг/г,в контрольной-1.20+0.01мкг/г (Р<0.001). Через 7 суток после нанесения ран концентрация гистамина в грануляционной ткани опытной группы снизилась до 1.68+0.08мкг/г,в то время как в контрольной отмечено увеличение ее-2,04+9.01мкг/г (Р<0.001). В коже наблюдалась аналогичная картина: в опытной-2.04+ +0.15мкг/г, в контрольной-2.43+0.21мкг/г (Р<0.2). Содержание серотонина на 3-е сутки в грануляционной ткани ран опытной группы было выше,чем в контрольной-2.07+0.8мкг/г, 1.5+0.1мкг/г (Р<0.001). В коже, окружающей раны, наблюдались обратные явления:опыт- ная группа-0.78+0.06мкг/г,контрольная1.62+0.05мкг/г (Р<0.001). На 7-е сутки показатели концентрации серотонина сохраняли такую же зависи- мость. В грануляционной ткани ран опытной группы-0.46+0.20мкг/г,в контрольной -0.22+ 0.006мкг/г (Р<0.001). В коже соответственно 0.18+0.007мкг/г и 0.32+0.01мкг/г (Р<0.001). На 3-е сутки после операции уровень цГМФ в опытной группе был достоверно выше контрольной-108.6+6.94 пмоль/г и 79.7+2.11 пмоль/г. В содержании цАМФ достоверных различий в этот срок не наблюдалось,нес- колько ниже концентрация цАМФ в опытной группе206.7+8.3пмоль/г,в конт- рольной-228.1+18.4пмоль/г. На 5-е сутки отмечено выраженное снижение цАМФ в обеих группах:опытной-9.47+ 1.40пмоль/г,контрольной - 13.8+0.32пмоль/г (Р<0.02) и увеличение цАМФ,соответствен- но-221.7+7.03пмоль/г и 256.7+23.7пмоль/г (Р<0.2). На 7-е сутки уровень цГМФ несколько увеличился в группах:опытной-25.3+2.11пмоль/г,контроль- ной-47.4+2.16пмоль/г (Р<0.001). В опытной групп концентрация цАМФ сни- зилась до 197.2+ 9.93пмоль/г,в контрольной продолжала увеличивать- ся-300,2+11.8 пмоль/г (Р<0.001). Соотношение цАМФ/цГМФ на 3-е сутки в опытной группе было 0.52,тогда как в контрольной-0.34. На 5-е сутки это соотношение было соответственно 0.04 и 0.05,а на 7-е сутки после операции-0.12 и 0.15. В энергообеспечении высокого уровня пролиферации ведущая роль принадлежит АТФ. Определение этого макроэрга в грануляционной ткани показало, что в опытной группе концентрация АТФ на 3-е сутки после операции в 5 раз превышала концентрацию в контроле:0.04+0.001млмоль/г, 0.008+0.0001млмоль/г (Р<0.001). В коже, окружающей раны,в опытной группе содержание АТФ равнялось 0.11+0.005млмол/г. Содержание белка в группе животных,раны которых обрабатывались эавр на 3-е сутки после операции было: в грануляционной тка- ни-312,2+4.4мг/г,в коже-282.2+18.00. В контрольной группе соответс- твенно-300.0+7.4мг/г и 298.6+14.70мг/г (Р<0.2 и Р<0.5). Синтез белка, определяемый по включению Н-пролина, в опытной группе-в грануляционной ткани-386+10.0имп/мин на мг. белка, в ко- же-330+6.0имп/мин на мг белка. В контрольной группе эти показатели бы- ли-265.13+13.0имп/мин на г белка (Р<0.01) b 348+73.0 имп/мин на г бел- ка (Р<0.5). На 7-е сутки содержание белка в грануляционной ткани ран опытной группы было 357+8.5мг /г,в контрольной группе-280+8.1мг/г (Р<0.01). В коже соответственно 308+6.8мг/г и 196+6.6мг/г (Р<0.001). На высоком уровне оставался и синтез белка в грануляционной ткани ран опытной группы-156+12.3 имп/мин на мг белка, в контрольной - 86+29.6 имп./мин на мг белка (Р<0.05). В коже вокруг ран соответственно 142+9.4 имп./мин на мг белка и 178+55.5 имп./мин на мг белка (Р<0.5). Проведенные исследования выявили накопление глюкозы в грануляци- онной ткани ран, обрабатываемых ЭВР к третьим суткам после операции. Это,по-видимому, связано с увеличением кровоснабжения в данной облас- ти, о чем свидетельствуют проведенные морфологические исследования. Избыток глюкозы способствует усилению гликолитического процесса в ра- не, как видно по увеличению активности ЛДГ и снижению концентрации продуктов гликолиза. В первые 3 суток после нанесения ран в грануляционной ткани ран- топытной группы наблюдаемое улучшение кровоснабжения приводит не толь- ко к увеличению поступления кислорода и полноценному окислению лактата и пирувата, но и вероятно, способствует вымыванию неокисленных продук- тов. Такие биохимические сдвиги способствуют высокой энергообеспечен- ности грануляционной ткани, обрабатывамых ЭВР. Это подтверждается 5-тикратным увеличением концентрации АТФ в тканях ран опытной группы. Электронномикроскопические исследования показали увеличение числа ми- тохондрий и их размеров в клетках фибробластичнского русла. Обнаруженное повышение концентрации цГМФ, являющегося посредником сигналов пролиферации в грануляционной ткани опытной группы говорит о высокой пролиферативной активности фибробластов. Об этом свидетельст- вует авторадиография-высокие индексы меченых ядер (ИМЯ) фибробластов. Наряду с интенсификацией гликолитического и окислительного про- цессов в ранах опытной группы, направленных на поддержание энергообме- на, отмечается и некоторое усиление активности ферментов пентозофос- фатного пути обмена углеводов (ПФП). Активация ПФП, главным образом направлена на обеспечение пластических процессов в ранах, в том числе синтеза белка. Это доказывается и повышением включения Н-пролина, ко- торый является предшественником синтеза коолагена, в грануляционной ткани ран опытной группы. Основными коллагенопродуцирующими клетками в ранах являются фибробласты. Возросшее количество гистамина в грануляционной ткани опытной группы играет большую роль в дифференцировке фибробластов,способствует усилению синтеза коллагена ими. Указанные биохимические сдвиги приво- дят к увеличенному содержанию белка в ранах опытной группы к 7-м сут- кам после операции, что вероятно свидетельствует в пользу стимулирую- щего действия ЭВР на репаративные процессы в ранах. Вышесказанное в равной мере относится и к коже вокруг раны, кото- рая играет большую роль в эпителизации дефекта за счет "вставочного роста". Таким образом,обработка ран ЭВР приводит к выраженным биохими- ческим изменениям. Усиление кровоснабжения активизирует гликолитичес- кие и окислительные процессы,которые в свою очередь приводят к улучше- нию энергетического обмена. Некоторая стимуляция ПФП обмена углеводов приводит к увеличению пластических возможностей грануляционной ткани ран. Это биохимические изменения,по-видимому,лежат в основе ускорения заживления ран под влиянием воздействия ЭВР. Таблица 3.9. Содержание ферментов в грануляционной ткани ран и коже, окружающей их ------------------------------------------------------------------- Грануляционная ткань ран 1 сутки 3 суток 7 суток 14 суток ------------------------------------------------------------------- контроль 1.95+ 1.73+ 1.36+ 1.42+ 0.051 0.045 0.089 0.063 ЛДГ опыт 2.14+ 1.37+ 2.35+ 2.03+ нмоль/с/г 0.043 0.038 0.083 0.040 Р 0.05 0.001 0.001 0.001 ------------------------------------------------------------------- контроль 3.29+ 2.30+ 2.14+ 2.06+ Глюкозо-6- 0.202 0.164 0.144 0.083 фосфат опыт 3.97+ 2.74+ 3.06+ 2.71+ 0.171 0.147 0.109 0.070 Р 0.05 0.2 0.01 0.01 ------------------------------------------------------------------- контроль 18.50+ 18.96+ 16.92+ 13.97+ Транскето- 0.310 0.570 0.070 0.591 лаза опыт 21.70+ 19.06+ 16.45+ 16.73+ нмоль/с/г 0.421 0.980 0.109 0.700 Р 0.001 0.5 0.02 0.05 ------------------------------------------------------------------ Кожа вокруг ран 1 сутки 3 суток 7 суток 14 суток ------------------------------------------------------------------ контроль 2.87+ 2.42+ 2.14+ 1.90+ 0.050 0.140 0.038 0.022 ЛДГ опыт 2.74+ 1.05+ 1.97+ 1.84+ нмоль/с/г 0.040 0.172 0.041 0.020 Р 0.1 0.001 0.05 0.1 ------------------------------------------------------------------ контроль 3.75+ 2.89+ 3.10+ 3.53+ Глюкозо-6- 0.204 0.284 0.010 0.232 фосфат опыт 1.35+ 2.85+ 3.14+ 4.79+ 0.244 0.236 0.008 0.212 Р 0.01 0.5 0.05 0.02 ------------------------------------------------------------------ контроль 13.14+ 16.37+ 18.03+ 9.76+ Транскето- 0.500 0.667 0.346 0.244 лаза опыт 15.54+ 11.65+ 14.74+ 7.47+ нмоль/с/г 0.624 0.489 0.401 0.308 Р 0.05 0.001 0.001 0.001 ------------------------------------------------------------------ Таблица 3.10 Содержание глюкозы,лактата и пирувата в грануляционной ткани ран и кожи,окружающей их ------------------------------------------------------------------ Грануляционная ткань ран 1 сутки 3 суток 7 суток 14 суток ------------------------------------------------------------------ 1 2 3 4 5 6 ------------------------------------------------------------------ контроль 4.72+ 6.72+ 5.80+ 5.47+ 0.16 0.465 0.158 0.228 Глюкоза опыт 3.77+ 8.40+ 6.72+ 5.62+ мкмоль/г 0.085 0.350 0.259 0.310 Р 0.001 0.05 0.02 0.05 ------------------------------------------------------------------ контроль 7.33+ 7.13+ 3.32+ 3.55+ Лактат 0.209 0.270 0.165 0.273 мкмоль/г опыт 6.43+ 5.87+ 5.62+ 4.52+ 0.210 0.125 0.096 0.390 Р 0.01 0.01 0.001 0.05 ------------------------------------------------------------------ контроль 0.08+ 0.10+ 0.11+ 0.11+ Пируват 0.008 0.008 0.125 0.0002 мкмоль/г опыт 0.085+ 0.104+ 0.115+ 0.060+ 0.0062 0.040 0.0021 0.004 Р 0.5 0.5 0.5 0.001 ------------------------------------------------------------------ лактат/ контроль 91.62 71.30 30.18 118.33 пируват опыт 75.64 56.44 48.86 75.33 ------------------------------------------------------------------ 1 2 3 4 5 6 ------------------------------------------------------------------ Кожа вокруг ран 1 сутки 3 суток 7 суток 14 суток ------------------------------------------------------------------ контроль 3.90+ 7.46+ 6.51+ 5.56+ 0.196 0.120 0.310 0.330 Глюкоза опыт 3.54+ 7.65+ 7.05+ 6.12+ мкмоль/г 0.174 0.665 0.060 0.002 Р 0.02 0.5 0.2 0.1 ------------------------------------------------------------------ контроль 6.99+ 7.92+ 9.47+ 10.62+ Лактат 0.710 0.970 0.240 0.360 мкмоль/г опыт 10.06+ 10.46+ 6.65+ 7.20+ 0.385 0.670 0.400 0.300 Р 0.01 0.05 0.05 0.001 ------------------------------------------------------------------ контроль 0.07+ 0.07+ 0.06+ 0.06+ Пируват 0.005 0.0003 0.005 0.006 мкмоль/г опыт 0.078+ 0.100+ 0.049+ 0.050+ 0.0080 0.0003 0.0003 0.0002 Р 0.5 0.001 0.001 0.01 ------------------------------------------------------------------ лактат контроль 99.85 113.14 157.83 177.01 пируват опыт 125.75 104.60 135.71 144.00 ------------------------------------------------------------------
![]() Дом. |
![]() Главная |
![]() Отзывы |