6.1. Морфологические основы бактерицидного эффекта анолита.
Для трансмиссионной электронной микроскопии микроорганизмы фикси- ровали в 2,5% растворе глутарового альдегида на 0,1 М фосфатном буфере при рН 7,4. Обезвоженную в спиртах и ацетоне восходящей концентрации взвесь заливали в смесь эпон-аралдита. Полутонкие (ПТС) и ультратонкие (УТС) срезы получали на ультрамикротоме "Ultracut" (Reichart-Jung, Австрия). УТС контрастировали в приборе "Ultrastein 2168" (LKB, Шве- ция) уранилацетатом и цитратом свинца и исследовали в трансмиссионном электронном микроскопе "Н-600" (Hitachi, Япония). ПТС окрашивали 0,5% раствором метиленового синего и 0,5% раствором фуксина. Для сканирующей электронной микроскопии материал фиксировали в 2,5% растворе глутарового альдегида на О,1М фосфатном буфере рН - 7,4, промывали в фосфатно-солевом буфере, дегидратировали в растворах аце- тона возрастающей концентрации и высушивали способом перехода через критическую точку закиси азота в аппарате HCP-2 (Hitachi). Кусочки монтировали на алюминиевые подложки электропроводящим клеем. На их по- верхность способом ионного напыления в аппарате IB-3 (Eiko, Japan) на- носили тонкий слой золота. Препараты исследовали в сканирующем элект- ронном микроскопе S-4O5 A (Hitachi) при ускоряющем напряжении 15 кВ. Статистическую обработку данных проводили методами вариационной и альтернативной статистики с применением компьютерных прикладных прог- рамм на IBM PC AT 386 SX. Создана база данных при помощи программы "Quattro Pro 4.0" с системой управления базой данных "Paradox 3.5". Корреляционный анализ данных проводили при помощи "Statgraph 2.1" и приложений "Windows 3.1". Графический материал создавался посредством графических программ "Harvard 3.0", "Boeing 2.3" и "Pbrush"("Windows 3.1"). Изучено влияние ЭВР-А с редокс потенциалом от +400 мВ до +1200 мВ на 500 млн. взвесь E.coli, Staph. aureus и 50 млн. Candida albicans, экспозиция 15-30 мин. Выявлено, что ЭВР-А вызывает выраженные изменения формы и разме- ров микроорганизмов Е.coli и Staph. aureus и грибов Candida albicans. Наблюдается достоверное увеличение количества дегенеративных форм мик- роорганизмов, что подтверждают и стереоморфометрические данные. Элект- ронная микроскопия показала, что обработка ЭВР-А в начале при- водит к уменьшению липидных и гликогеновых гранул в микробных клетках. с увеличением времени обработки и величины редокс потенциала появляют- ся микроэрозии на их поверхности, затем происходит нарушение целост- ности плазматических мемебран микроорганизмов, вплоть по полного раз- рушения (Рис.6.2, 6.3).
![]() Дом. |
![]() Главная |
![]() Отзывы |